Алукарда на долгое время заточили в подвалах родового поместья Хеллсингов и после смерти главы Ордена он сыграл немалую роль в жизни маленькой Интегры, когда спас её от претендующего на положение наследника дяди. «Освободив» вампира, Интегра стала единственной полновластной его хозяйкой. В дальнейшем Алукард составляет основную силу тайной организации, сражаясь как с вампирами-преступниками, так и с враждебно настроенными к Хеллсингу и Интегре организациями или отдельными людьми, попутно ища настоящего противника — вампира, по силе подобного себе.
В манге понятия добра и зла размыты, а вся история построена на битве Зла со Злом, находящимися лишь по разные стороны баррикад. Основой сюжета манги является множество сцен насилия.

Человек может стать вампиром только если его укусит другой истинный вампир, причем обязательным условием является целомудрие жертвы, в противном случае человек превращается в «упыря» или «гуля» (от англ. «ghoul» — вурдалак, вампир, упырь) — прислужника вампира, схожего с зомби. Единственное, на что способны упыри — слушаться своего хозяина и убивать с целью наживы. Укушенные упырями сами становятся упырями. Чтобы стать свободным от хозяина вампиром, ставший немёртвым должен выпить крови вампира-хозяина.
На вампира накладывается множество ограничений: свет ослабляет его, вампир не может пересечь водные пространства (океан или реку)[источник не указан 296 дней], и уязвим перед святынями и серебром. Степень осложнения зависит от уровня вампира.
Вместе с кровью убитых людей истинные вампиры поглощают их души, перенимая их опыт и знания. «Кровь — это деньги души, за них жизнь покупается и продается», — слова Интегры. Также вампиры могут использовать поглощённые души в своих целях, призывая их на поле боя (см. конец 8-го тома манги). Сила вампира напрямую зависит от того, сколько душ он подчинил.

Организация Хеллсинг
Организация Хеллсинг провозглашает себя Королевским Орденом Протестантских Рыцарей. Глава Ордена Интегра носит крест, проводит таинственные обряды (намек на женское священство) и проявляет немыслимый для традиционных христианских церквей либерализм, привлекая на службу Господу вампиров. Протестантизм особенно заметен в соперничестве с католической инквизицией в лице организации Искариот. Также рыцарь Ордена уничтожает «заблудших» приходских пасторов в готических церквях с органом и свечами, но без икон. Пули Алукарда изготовлены из серебряного креста Ланчестерского собора.

Миллениум
Основная статья: Миллениум (Хеллсинг)
Последний Батальон, Тайная организация «Миллениум», возглавляемая штурмбанфюрером СС Максимиллианом Монтаной. Была создана не без помощи Ватикана, оказывающего нацистам помощь при переносе проекта «Миллениум» в Южную Америку. Основная военная сила Батальона — фрики, искусственные вампиры — большей частью результат оккультных опытов ученого по прозвищу «Док» — правой руки Монтаны.

Искариот
Тринадцатый отдел специальных сил Ватикана, названный в честь Иуды Искариота, возглавляемый епископом Энрико Максвеллом и подчиняющийся лично Папе. Цель Искариотов — уничтожение вампиров и инаковерующих («богомерзких чудовищ и еретиков» по мнению Римской Католической церкви).

Организация Хеллсинг
Интегра Артур Файрбрук Вингейтс Хеллсинг — глава организации Хеллсинг. Характерная деталь — её имя на английском пишется как Интеграл (Integral)
Сэйю: Ёсико Сакакибара
Алукард — вампир. Состоит на службе семьи Хеллсинг.
Сэйю: Наката Дзёдзи
Виктория Серас[3] — полицейская, обращена Алукардом. Лучший боец подразделения «Хеллсинг».
Сэйю: Фумико Орикаса
Уолтер К. Дорнез — слуга и помощник Интегры Хеллсинг. Также известен как синигами, «Ангел смерти».
Сэйю: Мотому Киёкава
Пип Бернадотте — наёмник, командир отряда «Дикие гуси», нанятого Интегрой Хеллсинг.
Сэйю: Хироаки Хирата
Петер Фергюсон — полевой командир спецназа «Хеллсинга».
Сэйю ТВ-сериала: Унсё Исидзука

Миллениум
Макс Монтана — руководитель проекта «Миллениум». В манге больше известен как Майор.
Люк и Ян Валентайны — братья, искусственные вампиры. В манге «Хеллсинг» и аниме «Hellsing Ultimate» Ян и Люк работают на фашистскую организацию «Миллениум», которая существует со времен Второй мировой войны. Выполняя приказ её руководителя майора Макса Монтаны, в 5-й и 6-й ТВ-серии, OVA II братья организуют нападение на штаб-квартиру организации «Хеллсинг» в тот день, когда там проходит заседание Рыцарей Круглого стола. Ян уничтожен главой организации Хеллсинг — Интегрой Ван Хеллсинг, при попытке пробраться в кабинет заседания (дистанционно сожжён Миллениумом в OVA после провала миссии). Люк обозначен Алукардом как вампир 1 уровня, повержен и поглощён им. Появляется ещё раз в 9 томе манги во время битвы Алукарда с Уолтером (материализован Алукардом), убит Алукардом.
Рип Ван Винкль — вампир, инициированный электронным чипом, снайпер.
Ганс Гюнше — истинный оборотень, правая рука Монтаны. Истинный ариец, молчаливый. С 1-5 части принимает пассивное участие.
Эйвондейл Нейпьер — доктор, создатель искусственных вампиров, правая рука Монтаны.
Шрёдингер — мальчик-кот, адъютант Монтаны.
Тубалькаин Альхамбра — вампир-испанец, дэнди. В OVA III обещает руководству бразильской полиции бессмертие, в обмен на то, чтобы оно послало своих бойцов убить Алукарда.
Зорин Блиц — маскулинная женщина. С отрядом фашистов нападает на особняк Хеллсингов, убита Викторией.

Отдел Искариот
Энрико Максвелл — глава отдела Искариот. О собственно архиепископате Максвелла ничего неизвестно; вероятно, его вотчина — 13 отдел Ватикана.
Александр Андерсон — святой отец, паладин, охотник на нежить, боец 13 отдела ордена Искариот. Также известен как «Ангельская Пыль». Впервые персонаж появился в манге Angel Dust: Revenge Bible для журнала Papipo, но оригиналы рисунков у автора не сохранились, поэтому в «Хеллсинге» автору пришлось рисовать его сначала.[4]
Сэйю: Нати Нодзава (ТВ), Норио Вакамото (OVA)
Хайнкель Вульф и Такаги Юмиэ — напарницы-монахини, члены Искариота, в OVA 5 и последующих помогающие отцу Андерсону.

Другие персонажи
Инкогнито (ТВ-сериал) — вампир, сильнейший из противников Алукарда, не считая святого отца — Александра Андерсона.
Сэйю: Такуми Ямадзаки